'kromatografi' ile etiketlenmiş blog gönderileri

Bir HPLC kolonu, yüzlerce enjeksiyondan sonra bile yüksek oranda tekrarlanabilir performans verme yeteneğine sahiptir. Bununla birlikte, sınırlı bir ömre sahiptir ve bir süre sonra performansı , pik şekillerinin bozulması ve pikler arasındaki rezolüsyon, kolon geri basıncındaki düzensiz artış ve hayalet piklerin kromatgoramlarda tespiti ile bozulmaya başlar. Bu tür anormallikler, önerilen kullanım uygulamalarının benimsenmesi ve HPLC kolonlarının bakımı ile önlenebilir.

Tamponlar , Ters fazlı HPLC ayrımlarında önemli bir rol oynar. pH'daki değişiklikler, numune moleküllerinin iyonlaşma derecesini etkiler. Polar olmayan moleküllerde pH değişimi minimumdur, ancak doğası gereği asidik veya bazik olan polar moleküller de pH değişimi önem kazanır.

Kromatografi, organik bileşiklerin karışımlarındaki bileşenlerin ayrılması, tanımlanması ve miktarının belirlenmesi için laboratuvarda çok yönlü bir teknik olarak kullanılmaktadır.

HPLC, analitik araştırma ve kalite kontrol laboratuvarlarında önemli bir yere sahiptir. Hem üretim süreçleri hem de araştırma bulgularının yayınlanması ile ilgili önemli kararlar, yalnızca HPLC sistemi tarafından üretilen verilere yüksek derecede güvenilirlik yerleştirilebildiği takdirde ulaşılabilecek kararlara dayanmaktadır.

Kromatografi sistemlerinde ayrım mekanizmaları kromatgorafisi kolonunun dolgu maddesine ve haraektli fazın türüne göre veya uygulama biiçimlerine göre farklı başlıklar altında incelenebilir.

Elektrosprey iyonizasyon (ESI), yapısında bir kılcal iğneye sahiptir. Bu kılcal iğneye yaklaşık ± 3 ila 5 kV'luk yüksek bir voltaj uygulayarak içerisinden geçmekte olan numune çözeltisini püskürtür ve iyonlar üretir.

Kromatografinin ilk çalışmaları 1860'larda bir karbon yatağından geçirilen parafinin 'ağartılması' deneyine dayanır. Ancak kromatografinin resmi ve akredite ilk keşfi, çeşitli adsorbanlar üzerinde yaprak pigmentlerinin seçici adsorpsiyonu üzerine ayrıntılı çalışması ile 1902'de Mikhail Tswett'e aittir. Kromatografi tekniği Rus botanikci Mikhail Tswett tarafından klorofil ve ksantofil gibi bitki pigmentlerini, cam bir kolona dondurulmuş kalsiyum karbonattan (CaCO3) dolgu maddesinden oluşmuş bir sütundan geçirerek ayırmasıyla kullanılmıştır. Bu bileşenler renkli bantlar halinde gözlemlenmesi nedeniyle Yunancada chroma=renk; grephein=yazmak anlamına gelen kelimeler birleştirilerek ‘Kromatografi’ terimi oluşturulmuştur.

Yaygın MS dedektörleri, elektron çoğaltıcı ve mikro kanallı plaka (MCP) ile birlikte ikincil elektron emisyon işlemi ile çalışırlar. LC kromatogramı ile birlikte, dedektöre ulaşan iyon miktarı bir sinyal yoğunluğuna dönüştürülür ve bilgisayara gönderilir. İyon yönlendirici, kütle analizörü ve dedektörün tümü MS'de bir vakum içinde yer alır. Vakumda tutularak üretilen iyonlar, minimum çarpışma ve kayıpla MS'ye aktarılabilir, analiz edilebilir ve tespit edilebilir.

Sıvı kromatografisi (LC), ilk olarak 1900'lerin başında Rus botanikçi Mikhail Semyonovich Tswett tarafından gösterilen bir ayırma tekniğidir. LC, bir numunenin bileşenlerini, sabit faz ve hareketli faz yardımıyla tutma gücündeki farklılıklara göre ayırır.